如何打一場(chǎng)漂亮的細(xì)胞保衛(wèi)戰(zhàn)？

細(xì)胞污染是細(xì)胞培養(yǎng)的大敵，預(yù)防和避免污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。一旦輕敵就會(huì)前功盡棄，不僅浪費(fèi)時(shí)間，而且浪費(fèi)人力、物力，甚至造成無(wú)法彌補(bǔ)的損失。而且小編的童鞋也經(jīng)常向我抱怨：每到畢業(yè)季，就藍(lán)瘦，香菇是因?yàn)榧?xì)胞死了一批又一批，畢業(yè)遙遙無(wú)期��！那么如何打一場(chǎng)漂亮的細(xì)胞保衛(wèi)戰(zhàn)呢？下面就跟隨小編一起來(lái)學(xué)起來(lái)吧~

第一步：認(rèn)識(shí)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中有哪些污染？

細(xì)胞培養(yǎng)污染是指培養(yǎng)環(huán)境中侵入了對(duì)細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞變異的異物。體外細(xì)胞培養(yǎng)污染可分為三類：物理性、化學(xué)性及生物性污染。

物理性污染：

物理性污染通過(guò)影響細(xì)胞培養(yǎng)體系中的生化成分，從而影響細(xì)胞的代謝。

物理性污染的來(lái)源：培養(yǎng)環(huán)境中的物理因素，如溫度、放射線、振動(dòng)、輻射（紫外線或熒光）會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生影響。

物理性污染的現(xiàn)象：細(xì)胞、培養(yǎng)液或其他培養(yǎng)試劑暴露在放射線、輻射或過(guò)冷過(guò)熱的溫度中，可以引起細(xì)胞代謝發(fā)生改變，如細(xì)胞同步化、細(xì)胞生長(zhǎng)受抑制，甚至細(xì)胞死亡。

化學(xué)性污染

化學(xué)性污染是一些對(duì)細(xì)胞有毒性的或?qū)��?xì)胞產(chǎn)生刺激的化學(xué)物質(zhì)。

化學(xué)性污染的來(lái)源：

未純化的物質(zhì)、試劑、水、血清、生長(zhǎng)輔助因子及儲(chǔ)存試劑的容器都可能成為化學(xué)性污染的來(lái)源。細(xì)胞培養(yǎng)的必需養(yǎng)分（如氨基酸）若濃度超過(guò)了合理的范圍，也會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性。同樣，不同細(xì)胞系在最佳培養(yǎng)條件下對(duì)血清和緩沖液的要求是不一樣的，在培養(yǎng)中應(yīng)嚴(yán)格控制。

化學(xué)性污染的現(xiàn)象：化學(xué)性污染同樣會(huì)使細(xì)胞生長(zhǎng)受抑制，甚至細(xì)胞死亡。

生物性污染

生物性污染包括比較容易發(fā)現(xiàn)的細(xì)菌、霉菌和酵母的污染，和較難發(fā)現(xiàn)的病毒、支原體和其他細(xì)胞的污染。

生物性污染的來(lái)源：

● 取材不慎或處理不當(dāng)

● 空氣塵埃

● 消毒不嚴(yán)

● 操作不當(dāng)

● 試劑尤其是血清污染

生物性污染的現(xiàn)象：

● 細(xì)菌：G+菌較多。

● 真菌：霉菌較多。

● 支原體：不易檢測(cè)。

● 病毒：由于病毒有種屬特異性，所以病毒污染的概率比較小。

第二步：做好預(yù)防污染措施

針對(duì)細(xì)胞污染的三個(gè)分類，做好如下預(yù)防措施：

A.物理性污染的預(yù)防

● 實(shí)驗(yàn)室的合理設(shè)計(jì)及建立規(guī)范的操作規(guī)程；

● 培養(yǎng)箱應(yīng)放在恒溫的環(huán)境中；

● 培養(yǎng)液及試劑應(yīng)放在固定位置，而且要注意避光，試劑周圍不能放置同位素；

● 從冰箱中取出的培養(yǎng)液應(yīng)在室溫條件中放置一段時(shí)間后再進(jìn)行使用，以避免過(guò)冷的溫度對(duì)細(xì)胞的影響。

B.化學(xué)性污染的預(yù)防

● 使用的所有物質(zhì)都應(yīng)是高純度的，同時(shí)正確配制和儲(chǔ)存培養(yǎng)液及試劑。

● 在配制液體和清洗容器時(shí)必須使用不含雜質(zhì)的超純水。

● 選用同一批次的血清。

● 在選用器皿時(shí)，根據(jù)被培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)特性、培養(yǎng)方式和所用培養(yǎng)液的性質(zhì)來(lái)選用適合的器皿來(lái)達(dá)到實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。

C.生物性污染的預(yù)防

● 建立規(guī)范的無(wú)菌操作程序及各種規(guī)章制度，并嚴(yán)格執(zhí)行。

● 控制環(huán)境污染，同時(shí)注意實(shí)驗(yàn)人員的防護(hù)及無(wú)菌服的潔凈和無(wú)菌。

● 保證細(xì)胞培養(yǎng)基和器材無(wú)菌。

● 在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。

預(yù)防是防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中發(fā)生污染的最好辦法。只有提前做好預(yù)防工作，才能將發(fā)生

污染的可能性降到最小程度。