通常，一根色譜柱在分析數(shù)千個樣品之后性能仍然保持良好，但也有的色譜柱僅分析不多的樣品后幾乎就報廢了。影響色譜柱壽命和其它問題的因素很多，而有些因素是操作者很難控制的，如果被分析的樣品(如分析生物樣品)，怎么凈化樣品也是“臟"的，對于色譜柱的影響是非常大的。然而采取下列措施后，在多數(shù)情況下總能夠人為地減少色譜柱上故障，達到延長壽命的目的。

色譜柱預(yù)防及維護—避免高壓沖擊  

一般色譜柱都能經(jīng)得起高壓，但經(jīng)不起突然變化的高壓沖擊。引起高壓突然沖擊，主要是因樣品閥的緩慢轉(zhuǎn)動、泵起動快、柱切換操作等。轉(zhuǎn)動六通進樣閥時從泵到柱的液流會瞬時切斷。在閥的泵側(cè)壓力升高，在閥的柱側(cè)壓力降低(變化超過20%)。閥轉(zhuǎn)到底后壓力突然沖擊一下恢復(fù)正常。手動進樣閥的變化不大，自動進樣閥比較慢，可能造成壓力沖擊，可用氦氣代替空氣驅(qū)動進樣閥。因氮壓縮系數(shù)小。另外泵起動不應(yīng)過快，可分步操作。如用3mL/min流速，先從lmL/min到2mL/min，然后再3mL/min，每個間隔應(yīng)大于20s。柱切換技術(shù)的應(yīng)用也很廣泛，切換過程中在色譜柱的入口處壓力在零到很大數(shù)字之間變化，會很快使柱報廢。

色譜柱預(yù)防及維護—分離條件  

多數(shù)色譜柱有很寬的試驗條件范圍，但具體應(yīng)用又受到限制，主要是pH值、柱溫和流動相的選擇。硅膠為基質(zhì)的鍵合相要求PH在2.5～7之間，極端pH的流動相能“溶解"硅膠，使鍵合相流失。結(jié)果非堿性組分的保留不斷減少，堿性組分的保留增加，引起堿性組分峰變寬。如果一定要用高或低pH的流動相，可加預(yù)柱(飽和柱)。預(yù)柱裝在泵和進樣閥之間，用分析柱相同的填料填裝，或者用普通硅膠。硅膠飽和了流動相，減少了分析柱填料的損失。預(yù)柱不要求柱效高，用價格低的一般硅膠疏松地填裝，按期檢查硅膠的溶解情況。用預(yù)柱也有不利的影響，即新流動相難以平衡，保留時間不穩(wěn)定或穩(wěn)定慢。使用了預(yù)柱一定要加流路過濾器，以防止硅膠微粒引起的麻煩。以硅膠為基質(zhì)的柱和陰離子交換柱超過60℃后，會增加對流動相中化學(xué)物質(zhì)的吸附。在高溫下用小顆粒柱引起柱床塌陷，降低柱效，改變峰形。在40℃以上使用3μm柱，70℃以上使用5μm柱，會使值降低50%。

色譜柱預(yù)防及維護—加流路過濾器和保護柱  

流路過濾器緊靠進樣閥后面，位于分析柱前。0.5μm燒結(jié)不銹鋼片夾在死體積很小的套子中，擋住來源于樣品和進樣閥墊圈的微粒入柱。因為每個樣品都過濾既費事又帶來誤差，樣品量少過濾更困難，因此流路上裝過濾器是比較省事的辦法。也可以在流路加上保護柱，放在流路過濾器和分析柱之間，或者代替流路過濾器。保護柱的使命是收集阻塞色譜柱進口的來自樣品的化學(xué)“垃圾"。這種垃圾最終降低柱效能。保護柱是消耗品，分析50～100個比較臟的樣品之后就要調(diào)換新的。保護柱應(yīng)該是小體積，用分析柱的同種填料填裝。保護柱使用得當(dāng)，對分離無影響，好像未裝保護柱一樣。有些廠商的商品將保護柱和流路過濾器連在一個單元內(nèi)，使用起來非常方便。自己填裝保護柱都是用短柱、不超過3cm長，內(nèi)徑2～3mm，用較大粒度的填粒(15～20μm)干法填裝，會使分析柱效略微有所降低。

色譜柱預(yù)防及維護—用強溶劑定期沖洗色譜柱   

每次工作結(jié)束，用強溶劑沖洗柱是良好的習(xí)慣。可用甲醇、乙腈沖反相柱，沖去留在柱上的強吸附組分。用甲醇水為流動相時也應(yīng)沖洗。沖洗的程序在以下章節(jié)中介紹。柱頭的燒結(jié)不銹鋼濾片，要求平整，死體積小，孔徑適當(dāng)(2～5μm)。過濾片選擇不好會改變色譜峰形，增加阻力或起不到阻擋污染物的作用(填料很快變色)。

色譜柱預(yù)防及維護—凈化樣品  

用溶劑溶解的樣品，多數(shù)組分在一定的時間內(nèi)能完全從柱中流出來，不會造成危害。有些樣品可能含有微粒物質(zhì)，樣品中的某種組分(如蛋白質(zhì))在柱頭上沉積下來，組分在固定相上保留很強，溶劑帶走柱填料等，這些都會造成柱效能下降或?qū)χ鶋勖�的影響，有必要采取措施防止柱變壞�?/FONT>